皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ的分子克隆及其在不同锌含量日粮处理下的表达分析
伴侣蛋白CCT 在蛋白折叠、抗胁迫以及调节细胞生长等生理过程中担负重要作用.研究利用同源克隆和RACE 技术克隆了皱纹盘鲍伴侣蛋白CCTζ(HdhCCTζ)cDNA 全长序列,并对CCTζ基因的序列特征进行了分析.HdhCCTζ cDNA 序列长1960 bp,开放阅读框为1599 bp,编码532 个氨基酸,生物学软件推测其编码蛋白相对分子量为58.46 kD,等电点为6.53.BLAST 分析结果表明HdhCCTζ与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT 具有较高的同源性.生物信息学分析结果显示,HdhCCTζ蛋白序列中包含3 个典型的CCT 信号基序(35RTNLGPKGTLKML47,56LTKDGNVLLHEMQIQHP72 和84QDDITGDGT92)以及1 个腺苷三磷酸结合基序(89GDGTTS94).此外,在HdhCCTζ蛋白序列中还包含3 个糖基化位点(23NISA26,128NKSL131 and 234NVSL237).实时荧光定量PCR 检测结果显示,HdhCCTζ在皱纹盘鲍组织中为组成型表达,但主要集中在性腺、血淋巴和肝胰腺中表达.使用不同锌含量(6.69 mg/kg、33.85 mg/kg、710.63 mg/kg 和3462.5 mg/kg)的日粮来饲喂幼鲍20 周后,取其肝脏和血细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR 技术进行HdhCCTζ mRNA 的表达水平分析.分析结果显示,随着日粮中锌含量的增加,HdhCCTζ mRNA 在血淋巴和肝胰腺中的表达水平呈现上调的趋势.相比于锌适量组(33.85 mg/kg),过量的锌(3462.5 mg/kg)却能够下调HdhCCTζ mRNA 的表达水平.上述结果表明,HdhCCTζ的表达受到日粮中锌添加量的影响,而高表达量的HdhCCTζ可能在提高皱纹盘鲍机体抗胁迫过程中发挥重要作用.
伴侣蛋白CCT、皱纹盘鲍、cDNA克隆、mRNA表达、锌
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Q781(基因工程（遗传工程）)
the National Natural Science Foundation of China30972262;the Scientific Research Foundation to Dr.Chenglong Wu,Huzhou teachers CollegeKX23061 and RK23041
2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
393-402
