三角帆蚌精氨酸酶基因的cDNA克隆与组织表达分析
精氨酸酶(Arginase,Arg)是生物体尿素循环当中一种标志性的酶类,它不但与生物体许多疾病相关,而且是目前用于治疗肿瘤和癌症的一种重要的工具酶.根据三角帆蚌消减杂交cDNA文库获得的EST序列,运用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术获得三角帆蚌精氨酸酶基因的全长cDNA序列.生物信息学方法分析表明精氨酸酶基因cDNA序列长1720 bp,开放阅读框(65-1072)1008bp,编码335个氨基酸,5'端非编码区为64bp,3'端非编码区为648 bp,软件推测其编码蛋白相对分子量为36.81 kD.研究采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)方法分析该基因在不同组织中的表达规律,结果表明,该基因在肝脏、胃、肠、鳃、心脏、外套膜、斧足共7个组织中都有表达,但主要集中在肝脏、胃和肠消化器官中表达.这可能说明低等的无脊椎动物三角帆蚌的精氨酸酶兼具有Ⅰ型和Ⅱ型精氨酸酶的特征和功能,既可以参与尿素循环,又可以在生理和病理过程中发挥重要作用,但还需进一步验证.
三角帆蚌、精氨酸酶、RACE、实时荧光定量PCR、组织表达
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Q781(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目31040083;湖南省科技厅攻关项目06NK3049
2011-12-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
596-603