中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因全长cDNA克隆和重组表达
根据实验室分离自中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的一种蜕皮抑制激素(Molting-inhibiting hormone,MIH)N端氨基酸测序结果设计简并引物,采用RACE方法,首次从中华绒螯蟹眼柄中克隆到蜕皮抑制激素基因全长cDNA(Es-MIH,GenBank登录号:DQ341280),该基因全长为1457 bp,开放阅读框为330 bp,编码110个氨基酸(含有35个氨基酸的信号肽);其成熟肽包含C7-C44、C24-C40和C27-C53三个二硫键,有典型的CHH家族结构域.该cDNA编码的氨基酸序列与地蟹(Gecarcinus lateralis)MIH同源性最高,达到了85%.Northern杂交和半定量RT-PCR显示蜕皮间期成体蟹仅在眼柄中有MIH基因表达,提示该基因的表达具有一定组织特异性.利用pCR(R)T7/NT TOPO(R)TA系统重组表达MIH成熟肽,纯化的重组蛋白得率为0.3 g/L,纯化产物经质谱鉴定为中华绒螯蟹MIH.研究解决了CHH家族神经肽在机体中的表达量少,直接纯化较难的问题,为深入研究MIH的作用机制和在生产上控制中华绒鳌蟹蜕皮和生长奠定了基础.
中华绒螯蟹、蜕皮抑制激素基因、组织表达、重组表达、纯化
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Q781;Q786(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金30571421、30871907;天津市应用基础及前沿技术研究项目10JCZDJC18200、09JCYBJC15000、10JCYBJC09200;国家科技支撑计划项目2006BAD09A11;天津市高等学校科技发展基金计划项目20080618;天津师范大学博士基金项目52LX18119
2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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