蛙虹彩病毒一个序列保守基因(RGV-12L)的克隆表达及定位分析
从蛙虹彩病毒(Rana grylio virus,RGV)中克隆出一个虹彩病毒科的序列保守基因RGV-12L,序列分析表明该基因全长894 bp,编码一个含297个氨基酸的多肽,分子量为33 kD.构建包含该基因全长的原核表达载体,进行原核表达,获得了分子量约53 kD的融合蛋白.将融合蛋白经腹腔注射免疫小鼠,制备出鼠抗RGV-12L血清.通过RT-PCR和Western blotting分析RGV感染细胞后RGV-12L的转录时序,感染4h可以在RNA水平检测到RGV-12L的转录,感染8h可以在蛋白水平检测到RGV-12L的表达.用DNA复制抑制剂阿糖胞苷(Arac)进行药物抑制实验,鉴定出RGV-12L是一个晚期基因.免疫荧光分析显示RGV-12L分布于感染细胞的细胞核和细胞质中,在病毒加工厂中也有该蛋白的分布,提示该基因可能与病毒的装配、释放有关.
蛙虹彩病毒、RGV-12L基因、原核表达、RT-PCR、Western blotting、免疫荧光
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Q781(基因工程(遗传工程))
863课题2006AA100309;国家自然科学基金与广东省联合基金U0631008
2011-03-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1166-1171