凡纳滨对虾溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达和活性检测

摘要：

原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在,经变性和复性处理后活性仍较差.研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz 基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母 GS115 细胞,经组氨酸营养缺陷培养基筛选和PCR检测获得转化子.对其进行连续甲醇诱导表达,利用SDS-PAGE和C端携带的6 × His标签,对发酵液上清进行Western blot检测,结果表明19.3 kD左右的条带即是重组表达的溶菌酶蛋白.用溶壁微球菌平板抑菌法鉴定表达产物具有较强的抑菌能力.研究首次利用毕赤酵母真核表达系统实现对虾溶菌酶基因的可溶性表达,并且表达产物的活性良好.

关键词：凡纳滨对虾、溶菌酶、毕赤酵母、分泌表达、抑菌活性

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863重点项目计划"抗病功能蛋白渔药研制"2006AA100311

在线出版日期：2011-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1091-1096