抗草鱼出血病病毒转基因稀有(鮈)鲫的初步研究

摘要：

研究采用草鱼H1基因启动子,以草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)外衣壳蛋白VP7基因为靶基因,以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,构建了3个小发卡RNA(shRNA)表达载体pHlsiGCRV(x)-CMVeGFP.CIK细胞感染实验表明,pHIsiGCRV2-CMVeGFP具有较高的病毒抑制作用.通过显微注射将pH1siGCRV2-CMVeGFP导入稀有(鮈)鲫(Gobiocypris rarus)受精卵,获得转基因稀有(鮈)鲫P0代群体.转基因稀有(鮈)鲫攻毒实验显示,转基因稀有(鮈)鲫死亡率为30%,抗草鱼出血病能力显著提高.进一步的实时荧光定量PCR检测证实,转基因稀有(鮈)鲫脾脏、后肠和肝脏中GCRV的含量显著低于对照鱼,并随着时间的延续逐渐减少,转基因稀有(鮈)鲫体内GCRV的复制受到有效抑制.研究为抗草鱼出血病转基因鱼育种奠定重要基础.

关键词：RNA干扰、小发夹RNA、草鱼出血病病毒、转基因鱼

所属期刊栏目：34

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863项目2007AA10Z186

在线出版日期：2010-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：837-842