锯缘青蟹主要过敏原的纯化与鉴定
以锯缘青蟹为研究对象,从免疫鉴定、分离纯化、抗体制备和免疫学分析等方面对其主要过敏原进行研究.首先利用过敏者血清的免疫印迹法,确定锯缘青蟹的主要过敏原为分子量约38 kD的蛋白.然后通过制备丙酮粉、等电点沉淀、硫酸铵沉淀及加热处理对分子量为38 kD的主要过敏蛋白进行了高度纯化.该蛋白的pI约为4.5,与虾的原肌球蛋白Pen a 1性质相近,证实了锯缘青蟹的主要过敏原为原肌球蛋白.通过免疫新西兰大白兔,制备了原肌球蛋白的抗血清,采用Protein A Sepharose亲和层析柱对动物抗体进行了纯化.该抗血清效价高,经4×10~5倍稀释后仍能与抗原进行反应.该抗体与甲壳类动物及软体动物的原肌球蛋鞍白具有较强的免疫交叉反应.可用于食品过敏原检测.
锯缘青蟹、过敏原、原肌球蛋白、纯化
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TQ93(其他化学工业)
国家自然科学基金30871947;福建省自然科学基金2008J0067;福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划NCETFJ-2007;集美大学创新团队基金2008A002
2010-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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108-114