增殖细胞核抗原基因表达量与中肋骨条藻生长的关系

摘要：

对中国近海常见的赤潮藻-中肋骨条藻(Skeletonema costatum)生长相关的分子标记进行了研究,通过RT-PCR和RACE技术获得了其PCNA基因的部分序列,首次克隆测序得到了714bP的中肋骨条藻细胞色素b(Cytochrome6,Cyt 6)基因序列.根据得到的PCNA与Cyt b基因序列,分别建立了检测中肋骨条藻PCNA与Cyt b基因的实时荧光定量PCR的标准曲线,并通过对已知浓度样品的检测证明了所建立标准曲线的准确性.以上述建立的方法为基础,研究了中肋骨条藻生长率与增殖细胞核抗原基因表达量之间的关系.结果发现,平均单细胞中PCNA表达量在培养的不同阶段变化很大,且变化趋势与生长率表现出良好的一致性,说明PCNA表达量与细胞分裂密切相关,体现了其作为细胞增殖指标的潜能;而Cyt b基因表达稳定,表达量变化很小,说明Cyt b基因是一个潜在的良好的内参基因.基于此,提出以PCNA为目的基因、Cyt b为内参基因,将PCNA基因的相对表达量(REQ)作为中肋骨条藻生长率的一个指标,并建立了实验室条件下PCNA相对表达量与中肋骨条藻生长率之间的关系式.

关键词：中肋骨条藻、生长率、荧光定量PCR、PCNA、Cyt b

所属期刊栏目：33

分类号：Q344+.1(遗传学分支学科)

资助基金：国家自然科学基金项目40406028;国家高技术研究发展计划项目8632001AA635090资助

在线出版日期：2009-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：103-112