10.19790/j.cnki.JCM.2020.12.07
低强度脉冲超声促进BMSCs定向分化对兔软骨缺损影响研究
目的 膝关节内关节面软骨缺损是临床常见病,其治疗主要集中膝关节镜下滑膜清理联合微骨折处理,但对于缺损较大的患者,效果不佳.本研究探究低强度脉冲超声促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化在兔软骨缺损模型中的修复作用,以期为临床上利用超声技术对骨缺损的治疗提供新思路和方法.方法 以健康清洁级新西兰大白兔为研究对象,提取和培养兔源性BMSCs,采用免疫荧光染色和流式细胞仪鉴定BM-SCs,构建新西兰大白兔膝关节软骨缺损模型.根据处理方案的不同进行分组,BMSCs组单纯膝关节注射BMSCs细胞,超声组利用低强度脉冲超声进行处理,联合组利用低强度脉冲超声技术联合膝关节注射BMSCs细胞,对照组未做处理.采用组织大体学方法和Micro-CT检测软骨缺损的修复情况.采用HE、番红染色和Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及多聚蛋白多糖(Aggrecan)免疫组织化学染色检测软骨缺损模型.采用RT-qPCR定量检测CollagenⅡ及Aggrecan mRNA表达水平.结果 兔膝关节软骨缺损修复组织Ramallal评分结果显示,处理6周后联合组评分为(7.69±0.71)分,高于对照组的(2.89±0.34)分,F=9.389,P=0.016;12周后,联合组评分为(10.22±0.69)分,高于对照组的(4.11±0.46)分,F=9.786,P=0.019.HE和番红染色结果显示,处理6周联合组评分分别为(7.7±0.3)和(4.5±0.9)分,高于对照组的(5.9±0.7)和(1.4±0.2)分,F值分别为9.987和10.981,P值分别为0.021和＜0.001;12周后,联合组评分分别为(8.7±1.1)和(5.6±0.6)分,高于对照组的(6.0±0.5)和(1.5±0.2)分,F值分别为14.076和18.008,均P＜0.001.免疫组织化学染色结果显示,处理6周联合组CollagenⅡ和Aggrecan相对表达量分别为3.3±0.9和3.6±1.1,高于对照组的1.1±0.1和1.7±0.5,F值分别为15.116和19.987,均P＜0.001;12周后,联合组分别为4.7±1.6和5.3±1.2,高于对照组的1.2±0.3和1.8±0.7,F值分别为19.221和16.654,均P＜0.001.RT-PCR结果显示,处理6周联合组CollagenⅡ和Aggrecan的相对表达量分别为5.1±0.7和6.2±1.3,高于对照组的1.0±0.1扣1.0±0.4,F值分别为9.001和19.177,P值分别为0.019和＜0.001;12周后,联合组分别为5.9±1.2和5.9±1.3,高于对照组的1.4±0.2和1.2±0.1,F值分别为17.057和16.097,均P＜0.001.结论 低强度脉冲超声技术联合膝关节注射BMSCs细胞可以促进BMSCs向软骨细胞分化,促进软骨缺损的修复.
软骨缺损、低强度脉冲超声、骨髓间充质干细胞、修复
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R684(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)
2020-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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