氢气联合5-FU对人结肠腺癌细胞抑制作用及机制探讨

摘要：

目的 氢气可抑制鼠大肠癌细胞colon 26的增殖活性,并增强5-氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)的抗癌作用.本研究进一步探讨氢气对原代人结肠腺癌细胞作用以及氢气与5-FU协同抑癌作用的机制.方法 2018-06-09-2019-04-10于临沂市肿瘤医院获取新鲜的结肠腺癌手术切除标本6例,取结肠腺癌组织块经胰蛋白酶消化后进行原代培养;0.4 MPa压力下制备饱和氢气培养液;实验分为对照组、氢气组、5-FU组和氢气+5-FU组.采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)法和四甲基偶氮唑盐(methylthiazoletetrazolium,MTT)检测细胞活性;平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)与氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathion,GSSG)比值、Caspases-8和Caspases-9的酶活性;蛋白质印迹法检测NFκB蛋白表达.结果 对照组MTT吸光度和形成克隆数分别为0.56±0.153和155±13.2,5-FU组分别为0.413±0.090和113±9.6,氢气+5FU组分别为0.323±0.085和86±6.5,两两比较,均P＜0.05.对照组、5-FU组和氢气+ 5-FU组细胞的凋亡率分别为(3.62±0.29)％、(21.95±2.02)％和(32.11±3.54)％,两两比较,均P＜0.05;细胞内ROS水平分别为3.63±0.21、5.62±0.44和4.32±0.36,两两比较,均P＜0.05;细胞的NFκB p65蛋白相对表达量分别为0.15±0.01、0.67±0.76和0.43±0.31,两两比较,均P＜0.05.以上检测指标对照组与氢气组比较,均P＞0.05.结论 氢气与5-FU联合应用具有协调抗癌作用,其机制可能是氢气抑制了5-FU诱导的细胞内ROS水平升高和NFκB表达增强.

关键词：氢气、5-FU、原代人结肠腺癌细胞、活性氧

所属期刊栏目：17

分类号：R329.21(人体形态学)

在线出版日期：2019-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：831-837