一株低温蛋白酶产生菌的分离及该酶的鉴定与酶学性质表征

摘要：

从低温环境中分离并鉴定出 1株产低温蛋白酶的乙酰微小杆菌YD37(Exiguobacterium acetylicum YD37).对该低温蛋白酶基因序列分析发现,其基因全长 1110 bp,编码 370个氨基酸残基,分子量为 41.5 kDa,属于氨肽酶,富含短侧链和带负电荷的氨基酸残基,二级结构含有 14个α-螺旋和 19 个β-折叠,三级结构表面为带负电荷氨基酸构成的亲水表面.通过对E.acetylicum YD37发酵产酶的工艺进行优化,酶活提高 8.26倍,达到 273.5 U/mL.经硫酸铵沉淀和离子交换层析得到该低温蛋白酶的粗酶.粗酶的最适温度为 35℃,但 20℃仍能保持 43.6%的酶活.酶活受到Mn2+和Co2+的促进和乙二胺四乙酸的完全抑制,表明该酶是一种金属氨肽酶.该酶的动力学常数Km和Vmax分别为1.38 mg/mL和 4.41 mg/(mL·min).

关键词：乙酰微小杆菌、低温蛋白酶、氨肽酶、酶学性质、结构特征

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分类号：Q814.1;Q78;Q556.2

资助基金：广东省重点领域研发计划项目;泰山产业领军人才工程项目;青岛海洋生物医药研究院股份有限公司自有大健康项目

在线出版日期：2023-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：175-183