降解亚硝酸盐乳杆菌的筛选鉴定及其NiRs酶学性质

摘要：

控制食品中的亚硝酸盐含量是食品工业的热点话题之一,因此该研究以乳酸菌为研究对象,从中筛选出亚硝酸盐降解能力最强的菌株进行鉴定,随后分离纯化目的菌株的亚硝酸还原酶(nitrite reductase,NiRs),并研究其酶学性质.结果表明,亚硝酸盐降解率在90％以上的32株乳酸菌中,亚硝酸盐降解率最高的菌株36(目的菌株)的亚硝酸盐降解率为(96.36±0.37)％,为革兰氏阳性杆状菌,其糖类发酵试验结果与植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)一致;其16S rDNA基因序列长度为1464 bp,在NCBI中登录号为MN611150,与L.plantarum JCM1149同源性达100％,确定菌株36为植物乳杆菌.菌株36的NiRs比酶活为99.35 U/mg,回收率为15.5％,亚基相对分子质量约为47.8 kD;该酶最适温度为50℃,最适pH值为6.5,Km值为7.79 mmol/L,Vmax为5.84 mg/(L·min);当金属离子添加浓度在1 mmol/L～10 mmol/L,Fe2+、Fe3+和Ca2+对NiRs酶活力有显著激活作用(P<0.05),1 mmol/L和10 mmol/L的Na+以及10 mmol/L Ba2+也有显著激活作用(P<0.05);而1 mmol/L和5 mmol/L的Ba2+和K+对NiRs酶活力有显著抑制作用(P<0.05),但乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)对酶活无显著影响.

关键词：乳杆菌、亚硝酸盐、亚硝酸还原酶、鉴定、分离纯化、酶学性质

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分类号：TS201.3;Q939.97;S816.7

资助基金：内蒙古自治区科技计划重大专项项目;政府间国际科技创新合作重点专项;内蒙古自治区高等学校科学研究项目

在线出版日期：2022-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：164-171