RT-PCR结合高分辨率熔解曲线对两种致病菌的快速检测

摘要：

为建立食品中金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌的双重快速检测方法.用缓冲蛋白胨水(buffered peptone water,BPW)对两种目标菌进行增菌培养,采用直接提取法提取样本DNA,比较实时聚合酶链式反应体系(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)中的退火温度,调整高分辨率熔解曲线(high-resolution melting curve,HRM)分析条件,建立同时检测金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌的方法.结果表明,PCR扩增最佳退火温度为58℃,两种目标菌的Tm值分别为金黄色葡萄球菌77.05℃,单核增生李斯特氏菌79.39℃;试验灵敏度分别可以达到102、103 CFU/g.

关键词：实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、高分辨率熔解曲线、金黄色葡萄球菌、单核增生李斯特氏菌、双重反应

所属期刊栏目：41

在线出版日期：2020-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：205-210