基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮检测方法研究

摘要：

建立一种检测谷物样品中玉米赤霉烯酮的酶联免疫分析方法.将玉米赤霉烯酮修饰羧基制得半抗原,再与钥孔嘁血蓝蛋白偶联,免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合与筛选,得到3株具有高亲和力和特异性的杂交瘤细胞,分别为2E8、2C7、6E11,重链类型均为IgG1,轻链类型均为Kappa.细胞株2E8分泌的抗体特异性较好,制备腹水得到单克隆抗体用于后续实验.建立检测玉米赤霉烯酮的间接竞争酶联免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法,方法的灵敏度(IC50)为(0.13±0.02)ng/mL,检测限(IC15)为(0.02±0.01)ng/mL,在玉米和燕麦中的检出限分别为2.4μg/kg,4.0μg/kg.加标回收率为82.80%~109.20%,变异系数为3.27%~15.38%.经高效液相色谱串联质谱仪验证(R2=0.9963)二者具有良好的相关性.

关键词：玉米赤霉烯酮、单克隆抗体、间接竞争酶联免疫吸附法、高效液相色谱-串联质谱法

所属期刊栏目：38

分类号：R56;TH1

资助基金："十二五"国家科技支撑计划2013BAD18B11;国家国际科技合作专项项目2014DFR30350

在线出版日期：2017-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：111-115