枯草芽孢杆菌谷氨酰胺转胺酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

摘要：

以枯草芽孢杆菌DB104染色体DNA为模板,利用PCR技术扩增得到谷氨酰胺转胺酶基因tg,将其克隆至大肠杆菌质粒pET-22b(+)中,构建表达栽体pET-tg,并转化大肠杆菌BL21(DE3).重组菌经IPTG(异丙基β-D-硫代半乳糖苷)诱导,SDS-PAGE电泳分析,结果表明谷氨酰胺转胺酶得到了表达,表达量占菌体总蛋白的12%.诱导菌体经裂解后的上清与酪蛋白反应,显示其具有交联蛋白质的活性.经荧光法测定,诱导5 h的菌体酶活为1 590 U/g(DCW,cell weight,细胞干重),是出发菌株30 U/g(DCW)的52倍.

关键词：谷氨酰胺转胺酶、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、克隆、表达

所属期刊栏目：29

分类号：S81;S83

在线出版日期：2008-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：53-57