游动放线菌产阿卡波糖高通量筛选模型的建立及优化

摘要：

Actinoplanessp.SE50是Ⅱ型糖尿病治疗药物阿卡波糖的主要生产菌株,但是目前阿卡波糖高效检测方法仍存在瓶颈问题.该文采用酶标仪检测技术和孔板发酵构建阿卡波糖高通量检测模型,显著增强阿卡波糖高产菌株的筛选效率.首先,酶标仪检测结合孔板发酵结果表明,24孔板发酵与摇瓶发酵的相关性(R2=0.881 61)优于48孔板发酵(R2=0.833 74).24孔板发酵实验结果表明,孔板发酵存在边缘效应即阿卡波糖产量中间孔1区≤长边缘孔2区≤短边缘孔3区,对边缘孔填充无菌水可有效消除边缘效应.随后,为减少种子液培养工序,通过正交优化培养基中黄豆饼粉、甘油、碳酸钙的添加量,得出黄豆饼粉3％,甘油1.5％,碳酸钙0.4％(均为质量分数)配比最佳.最后,在最优条件下孔板发酵168 h,阿卡波糖产量可达到(2 183.66±6.60)μg/mL.该文介绍了一种孔板发酵结合酶标仪检测筛选方法,大幅缩短了摇瓶发酵液相检测所需工作量及时间,为快速筛选阿卡波糖高产菌株奠定了基础.

关键词：阿卡波糖、Actinoplanes sp.SE50、高通量、孔板发酵、发酵优化

所属期刊栏目：49

分类号：R965.1;R392.12;TQ465

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：73-80