代谢工程改造大肠杆菌生产氢咕啉酸

摘要：

维生素B12是唯一含有金属离子的维生素,其合成途径尤为复杂.大肠杆菌工程菌是生成维生素B12的新菌种.氢咕啉酸作为维生素B12合成途径重要的稳定中间体,通过代谢工程提高大肠杆菌氢咕啉酸的产量具有重要意义.经过不同宿主的对比发现BW25113(DE3)是生产氢咕啉酸的合适宿主.利用CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术将氢咕啉酸生物合成基因在染色体上表达,氢咕啉酸产量提高12倍,达到6.38 mg/L.增加前体尿卟啉原Ⅲ供应,氢咕啉酸产量再次提高,达到11.61 mg/L.敲除ackA-pta对氢咕啉酸产量提高没有效果.经过引入运动发酵假单胞菌来源的Entner-Doudoro"途径提高还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotin-amide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)水平,1株无抗菌株的氢咕啉酸产量提高到14.60 mg/L.该研究为大肠杆菌高效生产维生素B12奠定了基础.

关键词：氢咕啉酸、大肠杆菌、适配筛选、代谢工程、Entner-Doudoroff途径

所属期刊栏目：49

分类号：TQ460.38;R917;TQ921

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国科学院青年创新促进会项目

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：44-52