吡咯伯克霍尔德氏菌Burkholderia puraquae新型磷脂酶C催化特性及其应用研究

摘要：

酶法脱胶是一种植物油脂脱胶的绿色新工艺,具有反应条件温和、脱胶完全、副产物少、得油率更高、生产用水和废水排放少等特点,因此近年来受到油脂行业的广泛关注.磷脂酶C是油脂酶法脱胶技术重要的工业用酶之一,但目前已报道的磷脂酶C存在催化活性、稳定性不高、微生物来源酶不易分离纯化和重组酶多以包涵体表达等问题.该研究从吡咯伯克霍尔德氏菌(Burkholderia puraquae)克隆表达磷脂酶C基因plc_bp,构建重组大肠杆菌工程菌,研究重组酶酶学性质和油脂脱胶效果.通过镍柱亲和层析分子筛层析,得到纯化重组酶PLC_BP,SDS-PAGE分析表明该酶分子质量约为38 kDa.酶学性质研究表明,该酶最适温度和pH分别为60℃ 和8.5,具有较强的热稳定性,在60℃处理8 h保持50％左右活力.利用同源建模构建PLC_BP蛋白三维结构,发现该酶具有双核锰离子结合位点,通过定点突变鉴定D93和H169为锰离子结合关键位点.将该酶应用于不同来源毛油脱胶中,可以有效降低菜籽油、大豆油、花生油和葵花籽油的磷含量(5 mg/kg以下),满足后续油脂精炼要求,该研究成果为油脂酶法脱胶提供新的酶源和应用基础.

关键词：PLC_BP、酶学性质、酶法脱胶、双核锰离子结合位点、热稳定性

所属期刊栏目：49

分类号：TQ925;TS224.6;O643.36

资助基金：中原科技创新领军人才项目224200510017

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：38-43