通过解除磷酸糖胁迫提高枯草芽孢杆菌N-乙酰氨基葡萄糖合成能力

摘要：

N-乙酰氨基葡萄糖(N-acetylglucosamine,GlcNAc)在食品、保健品以及药品领域有着广泛的应用.该课题组前期构建了一株具有较高GlcNAc合成效率的枯草芽孢杆菌底盘细胞FMIK,由于GlcNAc前体的过量积累引起了磷酸糖胁迫,限制了FMIK的GlcNAc产量.因此,该文首先通过实施荧光定量PCR验证磷酸糖胁迫对于glcR-ywpJ操纵子转录水平影响,并通过凝胶迁移率确定GlcR与PglcR的结合能力;然后,利用易错PCR构建PglcR-ep突变体库,设计并使用基于荧光检测的高通量筛选系统,鉴定得到PglcR与GlcR结合的关键区域;最后,在FMIK菌株的基础上对筛选得到的PglcR与GlcR的结合关键区域进行敲除,得到工程菌株FMIK-m4.该菌株有效降低了GlcNAc前体浓度,解除了磷酸糖胁迫导致的二次生长现象,且摇瓶内GlcNAc产量提高至18.21 g/L.

关键词：枯草芽孢杆菌、N-乙酰氨基葡萄糖、磷酸糖胁迫、转录因子、磷酸酶

所属期刊栏目：49

分类号：R392.12;R977.6;S661.1

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：27-34