乙醛脱氢酶高产菌株的筛选及其酶学性质

摘要：

乙醛广泛存在于食品和环境中,具有高毒性、诱变性和致癌性,对人类健康有很大的危害.乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)能催化多种脂肪族和芳香族的醛类转化为相应的酸,以此降低醛类物质特别是乙醛对人体的危害.以葡萄为材料,通过双硫仑抗性筛选结合酶活性测定获得1株高产ALDH的菌株,并研究了该菌株产的ALDH乙醛降解能力及酶学性质.利用形态学特征及ITS rRNA基因序列的测定与分析对其种属进行鉴定.根据NADH在340 nm的吸光值变化量计算出ALDH活性,并通过顶空气相色谱测定其乙醛降解能力.鉴定菌株为热带假丝酵母,命名为Candida tropicalis LBBE-W1.采用超声波破碎法提取菌株LBBE-W1的粗酶液,随后分离纯化得到乙醛脱氢酶(Candida tropicalis acetaldehyde dehydrogenase,CTALDH),比酶活力为181.17 U/mg.CTALDH的最适反应温度为60℃,最适反应pH为8.0～9.0,在30～60℃和pH 5.0～9.0下处理2 h显示较好的稳定性.Na+、K+、Ba2+金属离子对CTALDH的活性具有明显促进作用;Ni2+、Cu2+、Mn2+对CTALDH具有较强的抑制作用.CTALDH的底物特异性研究表明,乙醛是其最适底物.CTALDH在2 h内对乙醛的降解率达到95.12％.通过研究获得了1株C.tropicalis LBBE-W1菌株,其产生的ALDH具有较高活性、稳定性和乙醛降解能力,为食品和环境中的乙醛降解提供了可能.

关键词：乙醛脱氢酶、热带假丝酵母、筛选、蛋白纯化

所属期刊栏目：49

分类号：TQ920.1;Q93;TQ465

资助基金：国家重点研发计划2019YFC1605800

在线出版日期：2023-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：38-45