萎缩芽孢杆菌Rk1壳聚糖酶高效制备及特性表征

摘要：

壳聚糖酶在壳寡糖酶法制备过程中发挥重要作用,高效制备壳聚糖酶为其产业化应用奠定基础.采用同源克隆获得萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)Rk1壳聚糖酶基因(bacsn46).将密码子优化和分子伴侣蛋白共表达进行结合,实现萎缩芽孢杆菌壳聚糖酶(BaCsn46)高效表达.通过表征分析获得重组BaCsn46酶学特性.bacsn46基因全长825个碱基,编码274个氨基酸,其中前32个氨基酸为信号肽序列.在7 L发酵罐条件下,重组菌最高发酵酶活力和总蛋白质量浓度分别达到7356 U/mL和5.95 g/L.重组BaCsn46最适反应温度和pH分别是60℃和6.0,金属离子Mg2+和Mn2+对重组BaCsn46具有激活作用,重组BaCsn46最小和最适水解底物分别是壳四糖和95％脱乙酰度胶体壳聚糖.此外重组BaCsn46能够高效水解不同浓度胶体壳聚糖,制备不同聚合度壳寡糖.

关键词：萎缩芽孢杆菌、壳聚糖酶、密码子优化、毕赤酵母、壳寡糖

所属期刊栏目：49

分类号：O649.4;TS201.2;Q786

资助基金：深圳市科技攻关面上项目20201024145915001

在线出版日期：2023-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：22-30