利用重组酶高效转化制备稀有人参皂苷C-Mc1和C-Mc

摘要：

为了高效制备稀有人参皂苷C-Mc和CMc1,调取了Terrabacter ginsenosidimutans中的人参皂苷酶基因,构建载体GST-bgpA,并转化到Escherichia coli C41(DE3)中表达,得到人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶.该酶分子质量为72.4 kDa,转化人参皂苷Rc的最适pH为7.0,最适温度为40℃,米氏常数Km值为6.25 mmol/L,Vm值为19.6 mmol/(h·L).为了降低成本,利用粗酶转化人参皂苷Rc制备C-Mc1和C-Mc.粗酶制备C-Mc1的反应条件:20 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应24 h;制备C-Mc的反应条件:5 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应60 h.此条件下,粗酶转化制备并分离纯化得到C-Mc1和C-Mc的单体,并经HPLC检测,其纯度均在90％以上.C-Mc1的酶转化制备:产物得到C-Mc和C-Mc1,其摩尔得率分别为74.9％和11.1％.C-Mc的酶转化制备:C-Mc的摩尔得率为93.2％.该研究为稀有人参皂苷C-Mc和C-Mc1产业化提供了依据.

关键词：人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶、高效制备、酶转化、人参皂苷C-Mc1、人参皂苷C-Mc

所属期刊栏目：48

分类号：R286.02;Q78;R394.8

资助基金：国家高端外国专家项目GDT20152100019

在线出版日期：2022-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：30-35