黑曲霉脂肪酶基因的克隆及其在黑曲霉中的同源表达

摘要：

旨在研究黑曲霉脂肪酶基因在黑曲霉中的同源表达情况.利用黑曲霉基因组作为模板克隆8种脂肪酶基因,与双元表达载体pCAMBIA连接构建8个表达载体.通过原生质体-PEG转化法,实现8个脂肪酶基因在黑曲霉中同源表达,其中转化子MA-H3-PglaA-SglaA脂肪酶活性最高.对该酶进行分离纯化和酶学性质表征,酶最适温度45℃,最适pH 7.5,K+、Mg2+等金属离子对脂肪酶有显著激活作用.酶底物特异性实验发现,该酶对底物pNPA亲和力最高,脂肪酶ANL-H3的Km为1.893 mmol/L,Vmax为1.610 mmol/(L·min).该研究为黑曲霉脂肪酶的同源表达提供了有效的策略和数据支持,可为食品级脂肪酶的开发和应用提供理论基础.

关键词：黑曲霉、脂肪酶、基因克隆、同源表达、酶学性质

所属期刊栏目：48

分类号：TS207.4;Q814;Q556.2

资助基金：国家自然科学基金31600639

在线出版日期：2022-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：14-19