A152G突变对GH43家族麦氏交替单胞菌木聚糖酶XynZT-2的影响

摘要：

前期研究发现GH43家族近缘物种相同位点存在天然突变.为了探究保守位点区域的基因突变对酶催化性能的影响,对来源于麦氏交替单胞菌(Alteromonas macleodii)的木聚糖酶XynZT-2利用软件计算、随机突变及天然存在的突变进行分子改造,定点突变第152位丙氨酸为甘氨酸(A152G),将原酶与突变酶基因转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达.酶学性质比较发现,突变酶XynZT-2A152G最适温度为55℃,相比原酶XynZT-2提高了10℃;突变酶XynZT-2A152G最适pH为7.0,而原酶XynZT-2最适pH为6.0,突变酶最适pH更偏中性;突变酶XynZT-2A152G在pH 3.0～9.0均保持80％以上相对酶活力,原酶仅在pH 3.0～7.0有80％以上相对酶活力,在碱性环境中,突变酶比原酶pH稳定性更好.定点突变A152G后,对酶的最适温度和pH稳定性均有显著影响.该研究为进一步了解GH43家族木聚糖酶的构效关系奠定了基础.

关键词：麦氏交替单胞菌;木聚糖酶;保守位点;定点突变;酶学性质

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资助基金：河南省教育厅重点研究课题:河南省科技厅科技攻关项目21A180024;212102210652

在线出版日期：2022-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：50-55