10.13995/j.cnki.11-1802/ts.027465
代谢改造热带假丝酵母提高D-乳酸的产量
乳酸是一种单羟基酸,因其羟基结合的位置不同分为D-乳酸和L-乳酸,在食品、医药和生物材料中具有广泛的应用.随着对可降解塑料的需求增加,利用生物法生产乳酸的研究也越来越受到重视.该文以二倍体热带假丝酵母(Candida tropicalis)为出发菌株,探究了丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,PDC)基因缺失以及D-乳酸脱氢酶(D-lactic acid dehydrogenase,D-LDH)和2-羟基酸脱氢酶(2-hydroxyacid dehydrogenase,2-HAD)基因的过表达对细胞生长和D-乳酸合成的影响.利用同源重组的方法敲除pdc1和pdc2基因以及整合d-ldh和2-had基因,成功构建了pdc1基因敲除菌株AK01、pdc2基因敲除菌株AK02、pdc1/pdc2基因敲除菌株AK03、2-had基因过表达菌株AK04、AK06和d-ldh基因过表达菌株AK05、AK07.结果发现,pdc1基因敲除的菌株AK01和AK03出现了一定的生长抑制且显著降低了菌株乙醇的产量;表达异源d-ldh的菌株AK05和AK07也出现了不同程度的生长抑制.和出发菌株相比,敲除pdc1基因同时整合异源d-ldh基因的菌株AK05能较好的生产D-乳酸,摇瓶发酵水平达到6.1 g/L,是出发菌株的29倍.
热带假丝酵母;丙酮酸脱基因;乳酸脱氢酶;基因敲除;D-乳酸
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Q939.97;R965.1;TQ929
2022-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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