重组表达D-泛解酸内酯水解酶乳酸克鲁维酵母的发酵工艺优化

摘要：

以前期构建的重组表达D-泛解酸内酯水解酶的乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)GG799为对象,在5 L发酵罐中,基于考察pH、搅拌转速、接种量3种单因素条件对产酶的影响结果,进一步优化补料策略,初步确定了促进重组D-泛解酸内酯水解酶高效表达的补料发酵方式.单因素条件研究结果表明,当pH 6.0、搅拌转速300 r/min、接种量2％时,可以获得最高表达水平,酶活力达5.12 U/mL,较摇瓶最佳结果提高了2倍.补料发酵研究表明,当通过补料维持发酵液恒糖质量浓度为5 g/L时,酶活力可达到8.20 U/mL,较分批发酵酶活力提高了60.1％;当分批发酵结束后,以恒速5 g/h进行补料,酶活力最高可达10.70 U/mL,较恒糖补料方式酶活力提高了30.5％,较分批发酵酶活力提高了98.6％.通过分批发酵和补料分批发酵的研究,显著提高了D-泛解酸内酯水解酶的酶活力,为进一步放大生产奠定了基础.

关键词：D-泛解酸内酯水解酶;搅拌转速;接种量;分批发酵;补料发酵

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资助基金：江苏省科技计划项目BE2018055

在线出版日期：2021-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：38-45