分子对接和定点突变提高内切菊粉酶的催化活力

摘要：

内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(inulooligosaccharides,IOS).低聚果糖是一种强效益生元,对人体健康有益,具有广泛应用价值.前期研究获得了Lipomyces starkeyi NRRL Y-11557来源的内切菊粉基因inu3B,并在大肠杆菌中进行了克隆表达.为进一步提高该酶催化活力,利用同源建模预测INU3B的三维结构,结合分子对接技术确定底物结合口袋附近的氨基酸,将筛选的关键氨基酸分别突变成丙氨酸,获得突变体M46A,比酶活力达到2611.40 U/mg,是原始酶的1.26倍.这可能是由于该位点的改变减小了结合口袋的外表面积、体积和深度,增强了酶与底物结合,从而增加了酶活力.M46A突变株具有工业生产低聚果糖的应用前景,也为定点突变技术改造酶活性提供了新思路.

关键词：内切菊粉酶;同源建模;分子对接;定点突变;催化活力

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资助基金：江苏省研究生科研与实践创新计划项目KYCX19_1869

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：57-62