牛肉PCR-核酸试纸条快速鉴定方法的建立及试剂盒的研制

摘要：

该研究建立肉类食品中牛肉 PCR-核酸试纸条快速鉴定方法,并开发快速检测试剂盒.对国家标准中牛的特异性引物进行标记,研发牛肉 DNA 快速提取试剂和基因检测试剂,采用核酸试纸条进行可视化检测;应用分子克隆及测序技术,克隆牛肉标准品;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察.提取基因组 DNA 的方法简单、快速,DNA 的完整性、浓度及纯度均非常好;退火温度59 ℃、在20 个循环时试纸条检测结果最特异,牛肉正品均出现 2 条条带,易混品及空白对照均出现 1 条条带.克隆测序后的牛肉 DNA 序列与牛线粒体 DNA 特异指纹区段序列同源性 100% .自主研发的试剂盒特异性、重现性、稳定性良好,模板 DNA 最低检出量为 1 pg/μL.该研究建立的 PCR-核酸试纸条方法特异性强、灵敏、准确、简便、快速;研制的试剂盒操作简便快速、结果可视稳定,适用于实地监测.

关键词：PCR;核酸试纸条;牛肉;快速检测试剂盒;分子克隆;测序

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资助基金：吉林省科技发展计划项目;吉林省科技创新中心建设项目;吉林省北华大学大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2021-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：275-281