10.13995/j.cnki.11-1802/ts.026609
金雀异黄酮对叔丁基过氧化氢诱导的衰老H9c2细胞的保护作用
探究金雀异黄酮(genistein, Gen)对叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide, TBHP)诱导的 H9c2 细胞衰老的保护作用及其机制.将 H9c2 细胞随机分为对照组、模型组( TBHP 200 μmol/L)及 Gen 低、中、高剂量组(0. 04、0. 2、1 μmol/L).采用 MTT比色法检测细胞存活率;β-半乳糖苷酶( senescence-associated β-galactosidase, SA-β-gal)染色法观察细胞衰老程度;比色法测定细胞总抗氧化能力( total antioxidant capacity, T-AOC)水平和超氧化物歧化酶( superoxide dismutase, SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-Px) 、过氧化氢酶(catalase, CAT)活性及丙二醛( malondialdehyde, MDA)含量;Western blotting法检测 P53、P21、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Kelch-like epichlorohydrin-related protein-1, Keap1)、核因子 E2 相关因子(nuclear factor erythroid-2-related factor 2, Nrf2) 、血红素氧合酶 1 ( heme oxygenase 1, HO-1)蛋白表达以及细胞磷脂酰肌醇-3-激酶( phos-phatidylinositol-3-kinase, PI3K) 、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT) 、细胞外调节蛋白激酶( extracellular regulatory protein kinase1/2, ERK1/2)、P38 丝裂原活化蛋白激酶( P38 mitogen-activated protein kinase, P38) 、c-Jun 氨基端激酶(c-jun amino-terminal kinase, JNK)蛋白及其磷酸化蛋白表达水平.结果表明,与模型组比较,Gen 组 H9c2细胞的细胞存活率显著升高,SA-β-gal染色阳性率显著降低;T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT 活性显著升高,MDA 含量显著降低;同时 Gen组 Keap1 表达下降,Nrf2、HO-1 蛋白表达水平上升;P53、P21 蛋白表达降低,PI3K、AKT 磷酸化蛋白表达水平升高,ERK1/2、P38、JNK磷酸化蛋白表达降低.该研究证明 Gen可延缓 H9c2 细胞衰老,提高H9c2 细胞的抗氧化能力,其机制可能与其通过 PI3K/AKT、MAPKs信号通路上调 Nrf2 表达有关.
金雀异黄酮;细胞衰老;抗氧化;氧化应激
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国家自然科学基金资助项目82060537
2021-10-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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