重组枯草芽孢杆菌全细胞催化合成钙二醇的初步研究

摘要：

钙二醇(25-hydroxy vitamin D3,25-OH VD3)是一种具有广泛生理活性及药用价值的物质.该文旨在通过分子生物学手段构建1株异源表达VD3羟化酶(VD3 hydroxylase,Vdh)的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600/pMA5-vdh,使其可以利用细胞催化系统合成25-OH VD3.该重组菌株经诱导表达后,首先利用CO差光谱法评价Vdh的体外活性,并将其用作全细胞催化剂合成25-OH VD3,随后通过优化温度、时间、转速及pH等全细胞转化条件,提高其转化合成25-OH VD3的产量.结果表明,37℃下培养24 h后,重组枯草芽孢杆菌B.subtilis WB600/pMA5-vdh的菌体裂解物酶活力达0.56 nmol/g;并且在底物质量浓度为0.1 g/L、外加18 g/L葡萄糖和22.5 g/L的2-羟丙基-β-环糊精的条件下,控制初始pH为7、反应温度30℃、转速200 r/min时进行全细胞转化反应48 h,得到25-OH VD3的转化率为10.36％,以上研究结果为制备和生产食品级25-OH VD3提供了新的思路.

关键词：钙二醇(25-hydroxy vitamin D3、25-OH VD3)、枯草芽孢杆菌、VD3羟化酶、异源表达、全细胞催化

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分类号：O63;TQ450.1;TQ203.2

资助基金：国家重点研发计划2018YFA0900300

在线出版日期：2021-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：17-22