乳酸乳球菌NZ9000中增强型绿色荧光蛋白报告系统的构建

摘要：

增强型绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,eGFP)基因是遗传操作系统中常用的报告基因,以eGFP为报告基因评价不同启动子在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000中的调控能力,寻找能够高效表达外源蛋白的强启动子.以实验室构建的携带eGFP基因的pIB184-eGFP质粒为载体,PCR扩增来源于pLp-Cas9-0537、pMG36e、pNZ44的启动子P11、P32、P44,将其分别克隆至pIB184-eGFP上,构建基于eGFP的报告系统.酶标仪定量测定eGFP的表达强度,比较不同启动子的转录活性.结果表明,在乳酸乳球菌中启动子P11转录的活力十分微弱,启动子P23、P32、P44的转录活性分别比P11高约23.9、7.8、4.1倍.该文利用基于eGFP的报告系统,筛选出适用于乳酸乳球菌中不同转录活性的启动子,为外源基因在乳酸乳球菌中的表达奠定了基础.

关键词：乳酸菌、乳酸乳球菌、增强型绿色荧光蛋白、报告系统、启动子

所属期刊栏目：46

资助基金：国家自然科学基金;上海市科技兴农重点攻关项目

在线出版日期：2020-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：46-51