副溶血性弧菌多克隆抗体制备及应用

摘要：

以热灭活副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP ATCC17802)免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,用间接酶联免疫吸附法测定抗血清效价,纯化后的多克隆抗体效价为512000.该抗体与5株副溶血性弧菌均能特异性结合,但与其他12株非副溶血性弧菌无交叉反应.在此基础之上建立了间接竞争酶联免疫吸附法(in-direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay,ic-ELISA),并优化了抗原抗体浓度、二抗浓度、封闭液等条件.结果表明,该法的线性范围为5×104～107 CFU/mL,线性回归方程为y=0.21x-0.74(R2=0.99),IC50为106 CFU/mL,最低检出限为1.7×104 CFU/mL,板内变异系数为2.61％ ～4.15％,板间变异系数为4.71％ ～8.74％.用建立的ic-ELISA检测市场中鱼、贝类养殖水和实验室用水中的VP,实验结果与国标检测方法的结果一致.该方法快速便捷,灵敏度高,准确性好,为进一步研究VP的快速检测奠定了基础.

关键词：副溶血性弧菌、多克隆抗体、ic-ELISA、水产品、致病菌

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资助基金：中央级公益性科研院所基本业务费专项中国水产科学研究院重点项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2020-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：157-161,166