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10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023374

食品级高产亮氨酸氨肽酶重组Bacillus subtilis的构建和发酵优化

引用
为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B.subtilis.首先通过Cre/lox系统敲除B.subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168(dal)-.其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-并转化至BS168(dal)-中得到食品级重组菌BS168(dal)-/pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-.该工程菌发酵产LAP无需添加抗生素且不含抗性基因.对该菌株进行5 L发酵罐条件优化,在转速300 r/min、温度33℃、pH 7.0、分阶段补料的条件下,酶活最高达到302 U/mL.结果表明,构建的食品级重组B.subtilis产LAP具有潜在的工业应用前景.

亮氨酸氨肽酶、D-丙氨酸消旋酶、枯草芽孢杆菌、食品级表达、发酵优化

46

企业横向协作项目;国家自然科学基金

2020-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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食品与发酵工业

0253-990X

11-1802/TS

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2020,46(8)

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