10.13995/j.cnki.11-1802/ts.023374
食品级高产亮氨酸氨肽酶重组Bacillus subtilis的构建和发酵优化
为解决枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在发酵产亮氨酸氨肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)需额外添加抗生素的问题,该研究构建了1株食品级产LAP重组B.subtilis.首先通过Cre/lox系统敲除B.subtilis 168基因组中D-丙氨酸消旋酶基因(dal)得到缺陷型菌株BS168(dal)-.其次使用高斯组装的方法构建以dal作为标记基因的质粒pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-并转化至BS168(dal)-中得到食品级重组菌BS168(dal)-/pMA5-lap-dal(AmpR,Ori)-.该工程菌发酵产LAP无需添加抗生素且不含抗性基因.对该菌株进行5 L发酵罐条件优化,在转速300 r/min、温度33℃、pH 7.0、分阶段补料的条件下,酶活最高达到302 U/mL.结果表明,构建的食品级重组B.subtilis产LAP具有潜在的工业应用前景.
亮氨酸氨肽酶、D-丙氨酸消旋酶、枯草芽孢杆菌、食品级表达、发酵优化
46
企业横向协作项目;国家自然科学基金
2020-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1-6