γ-CGTase酶学性质及产物特异性影响因素

摘要：

将γ-环糊精葡萄糖基转移酶(γ-CGTase)的特有区域作为判断依据,在美国国家生物信息中心(Nation-al Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库中,通过序列比对及生物信息学分析,筛选出一种新型基因,并将其克隆表达得到一种酶.利用高效液相色谱-质谱联用进行产物鉴定,表明该酶为γ-CGTase;酶分子质量大约为80 kDa,最适温度50℃,最适pH 10.0;无α-环糊精生成;甲醇、乙醇、环己烷、十二醇激活γ-CGTase活力,异丙醇和正丁醇抑制γ-CGTase活力;反应时间、淀粉质量浓度及乙醇体积分数均会影响γ-CGTase的产物特异性.HPLC结果显示,在10％的乙醇最终体积分数条件下,γ-CGTase催化产物中γ-环糊精的比例由40.11％增加至78.20％,专一性提高了94.96％.该研究提供了一种新型的γ-CGTase,为提高γ-CGTase产物特异性提供研究基础.

关键词：γ-环糊精葡萄糖基转移酶、酶学性质、乙醇、产物特异性

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资助基金：国家自然科学基金31701644;江苏省自然科学基金BK20170184;现代农业重点及面上项目BE2018304

在线出版日期：2020-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：38-45