基于纳米抗体的酶联免疫吸附法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B

摘要：

在前期已获得抗金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxinB,SEB)纳米抗体的基础上,建立一种用于检测食品中SEB的酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),为食品及农产品质量监管提供技术支持.优化表达条件后,通过大肠杆菌原核表达获得抗SEB的纳米抗体B7;以纳米抗体B7作为捕获抗体,以噬菌体展示的抗SEB纳米抗体B6为检测识别元件,建立夹心ELISA方法;以牛奶、牛肉及西瓜汁为样本对其进行方法学评价.结果 显示,纳米抗体B7在大肠杆菌中成功表达,表达量为6.2 mg/L;该方法在16～1 024 ng/mL具有良好的线性关系(R2 =0.990 4),最低检出限为(9.58±0.07) ng/mL;该方法与SEC有42.18％的交叉,与SEA及另外3株金黄色葡萄球菌无明显交叉;牛奶、牛肉和西瓜汁的加标回收率分别为87.26％～108.43％,79.36％～106.56％和83.81％～99.43％.该方法以纳米抗体作为识别元件,可应用于实际食品及农产品中的SEB高灵敏检测,具有广阔的应用前景.

关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B、纳米抗体、噬菌体、酶联免疫吸附法、高特异性

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资助基金：国家自然科学青年基金项目31801627;国家级大学生创新创业训练计划项目201810712075

在线出版日期：2019-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：250-255