德尔卑沙门氏菌血清型分子检测靶点筛选及多重PCR检测方法的建立

摘要：

利用比较基因组技术筛选到德尔卑沙门氏菌(Salmonella Derby,SD)的血清型特异性基因,以此为靶点设计引物与139-141引物共同构建多重PCR检测体系,对其特异性、菌落灵敏度、抗干扰能力及人工污染等方面进行评价.当扩增出171、284和512 bp电泳条带时,检测结果为阳性.通过该方法检测39株沙门氏菌和18株非沙门氏菌,表现出100％特异性,该检测体系的DNA灵敏度为383.2 pg/μL,菌落灵敏度为52 CFU/mL.当SD与自然(猪肉、鸡肉和牛肉)的背景菌群浓度比为1∶104时,该检测体系能获得清晰、准确的3条扩增条带.在人工污染的猪肉、鸡肉和牛肉样品的检测中,增菌10 h,检测灵敏度为3.8 CFU/25g.该检测方法准确灵敏的检测SD,可在食品安全领域得到广泛应用.

关键词：德尔卑沙门氏菌、多重PCR、血清型特异性基因

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资助基金：高校优秀青年人才支持计划重点项目gxyqZD2016219;安徽科技学院人才引进项目SPYJ201602

在线出版日期：2019-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：269-275