多点突变提高α-L-鼠李糖苷酶热稳定性

摘要：

为了提高α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性,对实验室前期构建的K406R、K440R、K573V、E631F四个不同氨基酸位点的单点突变体进行联合突变,得到了K406R-K573V、K406R-E631F、K440R-K573V、K440R-E631F四个联合突变体.结果表明,相比于野生型(wild type,WT),联合突变体K440R-K573V和K440R-E631F的热稳定性有所提高,在60℃时半衰期分别提高了1.13倍,1.44倍;在65℃的半衰期分别提高了1.64倍,1.64倍;在70℃的半衰期分别提高了1.88倍,1.68倍.对突变体K440R-E631F进行圆二色谱分析、分子动力学以及分析微观结构变化分析可知,K440R-E631F突变体与WT相比,内部疏水性有所提高,二级结构中α-螺旋、β-转角、无规则卷曲含量增多,可能与热稳定性的提高相关.

关键词：α-L-鼠李糖苷酶、联合突变、热稳定性

所属期刊栏目：45

资助基金：国家自然科学基金31371751

在线出版日期：2019-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：23-29