反转录-环介导等温扩增技术快速检测志贺氏菌

摘要：

建立了反转录-环介导等温扩增技术的志贺氏菌快速检测方法.针对志贺氏菌特异保守基因ipaH设计多套引物,建立优化了的反应体系,并评价其准确性、特异性、灵敏度.以人工污染脱脂乳样品比较RT-LAMP与RT-PCR的灵敏度.结果表明,在65℃等温条件下,RT-LAMP反应可在30 min内完成.在活菌/损伤菌模型中,该方法表现出比国标法更好的准确性.在23株细菌标准菌株中仅对4株志贺氏菌有特异性检出.志贺氏菌RNA模板的检测灵敏度为7fg/μL.人工污染脱脂乳样品检测灵敏度达到40 CFU/g,比RT-PCR方法高出2个数量级.表明所建立的志贺氏菌RT-LAMP扩增方法可以准确的检测志贺氏菌,同时具有快速、特异、灵敏的优势,可用于志贺氏菌的快速筛查和现场监控.

关键词：反转录环介导等温扩增、志贺氏菌、ipaH基因、快速检测

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在线出版日期：2019-04-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：193-199