产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母高密度发酵及产物的分离纯化研究

摘要：

以实验室构建的产抗菌肽PSI的重组乳酸克鲁维酵母基因工程菌作为出发菌株,在摇瓶培养的基础上,建立了100 L发酵罐中高密度发酵工艺及产物分离纯化方法.研究了不同培养基、菌体密度、诱导物及其添加方式等对产物的影响.结果表明,用BSM培养基发酵培养至菌体密度达到190 g/L时开始添加乳糖诱导,乳糖添加量为5 kg,补料流加速度为1 L/h,诱导25 h,菌体细胞湿重达280 g/L,发酵液中蛋白产量达27.8 mg/L,抗菌肽PSI效价达到2.36×109 U/L.采用多种分离纯化方法对发酵液中抗菌肽PSI进行分离纯化,结果表明,阴离子交换色谱纯化效率最高,纯化后蛋白效价为8.83×109 U/L,其次为丙酮沉淀、超滤、硫酸铵分级沉淀,纯化后蛋白效价依次为6.35×109、4.56×109、3.28×109 U/L.

关键词：抗菌肽PSI、乳酸克鲁维酵母、基因工程菌、高密度发酵、分离纯化

所属期刊栏目：44

资助基金：国家自然科学基金31400437;国家自然科学基金31560121

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：13-21