甜味剂莱鲍迪苷D的高效生物催化合成

摘要：

采用来自水稻的UDP-糖基转移酶EUGT11并结合染色体改造构建了大肠杆菌工程菌,用于全细胞催化莱鲍迪苷A(Rebaudioside A,RA)生产莱鲍迪苷D(Rebaudioside D,RD).为了增加宿主细胞内源性糖配体葡萄糖尿苷二磷酸(uridine diphosphate glucose,UDPG)的供给以满足糖基化反应需要,以大肠杆菌BL21(DE3)为出发菌对UDPG代谢通径进行改造,获得了一系列改造菌株SG1、SG2、SG3和SG4.其中以SG4为宿主过表达可高效催化RA合成RD的糖基转移酶EUGT11进行全细胞催化,RD产量高.随后以此工程菌为对象,对可能影响RD催化合成的条件进行了研究,结果表明50 mL培养菌液离心所收集新鲜菌体可在100 mmol/L pH 8.0磷酸钠缓冲液、80 mmol/L柠檬酸钠、体积分数0.1％ Triton X100、500 g/L蔗糖、5 mmol/L ZnCl2、42℃转化1d的条件下催化1 mmol/L RA底物生成1112.21 mg/L RD,转化率可达98.5％.

关键词：甜叶菊、莱鲍迪苷A(Rebaudioside A、RA)、莱鲍迪苷D(Rebaudioside D、RD)、重组大肠杆菌、全细胞催化

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资助基金：国家自然科学基金31670099;中国科学院STS项目KFJ-SW-STS-164-08

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7