α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶在毕赤酵母中的表达及其对大麦麦芽过滤性能的影响

摘要：

PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)基因组扩增获得1个全长1 790 bp的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,基因含有1个50 bp的内含子序列,其对应的蛋白质序列含有5个O糖基化位点和9个N糖基化位点,N端含有18个氨基酸的信号肽序列.将目的基因与表达载体pPICZαA连接并在毕赤酵母X-33诱导表达,获得重组α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶.重组酶的相对分子质量为70 kDa,最适反应pH和温度分别为pH 5.5和50℃;金属离子Cu2+、Zn2+和Fe2+对重组酶的酶活有抑制作用,Fe3+对重组酶的酶活有促进作用;以4-Nitrophenyl α-L-arabinofuranoside为底物测得酶的Km值和Vmax值分别为0.78 mmol/L和2.57 μmol/(min·mg).在大麦麦芽协定糖化的初始阶段添加31.2 mU/g重组酶,麦汁的过滤速度提高了12.8％.以大麦麦芽阿拉伯木聚糖为底物,α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶与木聚糖酶有较好的协同作用.

关键词：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、克隆表达、麦芽、过滤性能、协同作用

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资助基金：啤酒用新酶创制与低碳制造关键技术研究,国家高技术发展863计划2013AA102109:江苏高校优势学科建设工程资助项目;江苏省现代工业发酵协同创新中心资助

在线出版日期：2018-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：48-54