米根霉α-淀粉酶保守区域组氨酸突变及功能性质

摘要：

有关真菌α-淀粉酶的研究主要集中在酶的底物催化形式等生化性质方面,该类酶中的大量氨基酸残基组成与酶功能性质之间的关系尚不明确.利用分子对接和同源比对等生物信息学分析方法发现米根霉α-淀粉酶中有3个特殊的组氨酸残基(H120,H200和H286),并利用定点突变的方法构建了系列突变体.性质研究表明,286位氨基酸残基结构与该酶的最适反应温度、最适反应pH、酸耐受性以及麦芽糖生成能力均有关联;突变体H286L的酸耐受性和水解淀粉的麦芽糖生成能力得到显著提高;120位和200位氨基酸残基的变化不改变该酶的最适反应温度和最适反应pH,而两者的组合突变可显著提升该酶的酸耐受性.此外,数据表明该酶的高麦芽糖生成能力与酶对麦芽三糖的亲和力不直接相关.研究结果可为真菌α-淀粉酶高麦芽糖生成能力的原因及其定向进化提供一定理论参考.

关键词：真菌α-淀粉酶、分子对接、定点突变、结构与功能、麦芽糖

所属期刊栏目：43

分类号：O6 ;TQ

资助基金：国家自然科学基金青年项目31401630;安徽省自然科学基金1708085QC63

在线出版日期：2018-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：22-29