Lactobacillus plantarum苯丙酮酸还原酶的异源表达及其在苯乳酸制备中的应用

摘要：

构建产苯丙酮酸还原酶的基因工程菌E.coli/ppr,优化其目的蛋白表达条件,并利用全细胞催化制备光学纯的D-苯乳酸.以Lactobacillus plantarum的基因组DNA为模板,经PCR扩增出一种编码苯丙酮酸还原酶的基因(ppr),并将其在大肠杆菌BL21中进行表达.以苯丙酮酸为底物,通过单因素和正交试验优化诱导表达条件,然后对E.coli/ppr全细胞制备苯乳酸的工艺进行研究.结果表明:E.coli/ppr在IPTG终浓度为0.5 mmol/L,20 qC诱导8h时具有最高的苯丙酮酸还原酶活性.由其催化制备苯乳酸的最佳条件为:反应温度40℃,反应初始pH6.5,葡萄糖浓度20 mmol/L.在上述条件下增加苯丙酮酸的浓度至25 mmol/L,5h后苯乳酸的最终产率达到98.4％,产物D-苯乳酸光学纯度ee＞ 99.9％.

关键词：苯丙酮酸还原酶、表达、苯乳酸、条件优化、全细胞催化

所属期刊栏目：43

分类号：TQ4;O64

资助基金：国家自然科学基金项目21676117;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目SJLX16-0472

在线出版日期：2018-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：16-21