嗜热脂肪土芽孢杆菌普鲁兰酶基因的异源表达及重组酶性质

摘要：

用PCR方法扩增得到嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)XQ3506的普鲁兰酶编码基因GsP,在大肠杆菌中进行异源表达.在没有外源信号肽的条件下,重组酶部分分泌到周质中,少量分泌到培养液中.重组酶表观分子量约为81 kDa,纯酶比活力为38.2 U/mg.重组酶最适温度为60℃,能短时耐受70℃高温;重组酶最适pH6.5,在pH5.5～7.5的范围内具有较好的稳定性;重组酶Km值为0.086 μmol/L,Vmax为0.083μmol/min;K+和Mg2+对重组酶有激活作用,而Ca2+则有抑制作用.重组酶水解普鲁兰糖产物为单一麦芽三糖,对直链淀粉未发现降解作用,是一种Ⅰ型普鲁兰酶.重组酶GsP在直链淀粉、抗性淀粉生产和粉丝酶法生产工艺中有一定的应用前景.

关键词：嗜热脂肪土芽孢杆菌、异源表达、Ⅰ型普鲁兰酶、蛋白纯化、酶学性质

所属期刊栏目：43

分类号：TQ9;TS2

资助基金：国家863高技术研究发展计划2013AA102101-5

在线出版日期：2017-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：30-36