10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201608031
白酒中邻苯二甲酸二乙酯的化学发光酶联免疫分析方法
以邻苯二甲酸二乙酯(diethyl phthalate,DEP)为研究目标,以4-氨基邻苯二甲酸二乙酯为半抗原,通过重氮法偶联载体蛋白并免疫动物,制备针对DEP的特异性兔多克隆抗体.通过棋盘滴定法和单因素实验确定最佳的实验参数,即包被抗原浓度为50 ng/mL,4℃环境下包被12h;抗体用T液稀释;药物缓冲液选用pH 5.4、0.005 mol/L的PBS缓冲液;酶标二抗用P液稀释,稀释度为1/3000;反应时间是:一抗∶二抗=30 min∶40 min.基于此建立了间接竞争化学发光酶联免疫法检测DEP.该方法对DEP的最低检测限(LOD)为3.09 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为5.93~42.03 ng/mL,半抑制浓度(ICs0)值为16.57 ng/mL,与14种结构类似物及功能类似物交叉反应均远低于0.5%,通过对白酒样品添加回收率的测定,证明了该方法的准确性,适用于白酒中DEP的快速检测.
邻苯二甲酸二乙酯、化学发光酶联免疫、间接竞争
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O65;O64
农业部农产品质量安全风险评估专项GJFP201501202;广东省科技计划项目2013B020204001
2016-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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