Clostridium clariflavum DSM19732木聚糖酶Xyn2441的克隆表达及条件优化

摘要：

Clostridium clariflavum DSM 19732是一种颇具应用价值的木质纤维素降解菌,尤其对半纤维素的降解能力非常高,国外学者已开始关注其中木质纤维素降解酶类的结构与功能,国内尚无相关报道.作者首次从复合菌系RXS基因组DNA中扩增出C.clariflavum DSM 19732的一个表达双功能木聚糖酶(糖苷水解酶家族(glycosyl hydrolase family,GH)10和11的木聚糖酶)的基因Clocl-2441,并将其与载体pET28a(+)连接,在大肠杆菌E.coii BL21(DE3)成功表达.重组菌最佳诱导表达条件为:添加诱导剂时的菌体量OD600值约为1.25、诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L、诱导时间7～8h及诱导温度25℃,此时胞内重组酶比酶活达到34.92 U/mg.经镍柱初步分离纯化后比酶活达713.16 U/mg,纯化倍数20.83倍,回收率27％.重组酶的最适反应温度和pH分别为70℃和6.5.

关键词：Clostridium clariflavum DSM 19732、木聚糖酶、Clocl-2441、克隆表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：42

分类号：S64;X7

资助基金：国家自然科学基金31260024;111引智计划111-2-06

在线出版日期：2016-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：16-22