定点突变提高碱性果胶酶热稳定性

摘要：

碱性果胶酶(PGL,E.C.4.2.2.2)是一种重要的工业酶,在碱性条件下催化聚半乳糖醛酸的α-1,4糖苷键裂解,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业.为提高酶热稳定性,将Bacillus sp.WSHB04-02 PGL与3种耐热酶进行氨基酸序列比对,确定7个在耐热酶中保守但在PGL中不保守的位点(I58、N189、G191、S229、K314、S315和I325)作为改造的目标位点,单独突变为耐热酶中的保守氨基酸.酶学性质分析显示,PGL突变体热稳定性均有提高.与野生酶相比,N189E、S229K和I325F的55℃半衰期分别提高2.32倍、2.11倍和1.89倍;I58V和K314M 55 c℃半衰期分别提高19.4％和38.9％,比酶活分别提高65％和91％.结构分析显示,除S315G外的PGL突变体的分子内的多种作用力数量均发生改变.上述结果表明,定点突变能有效提高PGL热稳定性,分子间作用力的变化可能是酶学性质变化的重要原因之一.

关键词：碱性果胶酶、氨基酸序列比对、定点突变、热稳定性、作用力

所属期刊栏目：41

分类号：TQ2;TE6

在线出版日期：2015-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6