β-半乳糖苷酶全细胞催化制备低聚半乳糖工艺优化

摘要：

β-半乳糖苷酶能以乳糖为底物生产低聚半乳糖.利用前期构建的产β-半乳糖苷酶F441Y重组毕赤酵母为菌种,进行摇瓶发酵并诱导培养.酵母菌体经过离心、洗涤后作为全细胞催化剂用于转化乳糖制备低聚半乳糖.为了提高转化率,首先通过单因素实验,优化了反应的初始pH、温度、乳糖浓度、加酶量和反应时间等因素.在此基础上,采用正交实验进一步优化了反应条件,优化后的最佳条件为:反应初始pH 6.0,反应温度为80℃,乳糖浓度为80％ (w/v),加酶量为5 U/mL.在最佳转化条件下,反应24 h,低聚半乳糖的最高转化率为59.9％.与游离酶转化方法相比,该反应体系中的杂蛋白和美拉德反应较少,更有利于低聚半乳糖产品的后续分离.该研究建立的全细胞酶转化方法,具有转化率高、简单易行以及容易操作等优点.

关键词：β-半乳糖苷酶、毕赤酵母、全细胞催化剂、条件优化、低聚半乳糖

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资助基金：本研究由国家自然科学基金No.31271813和No.31401636和111工程No.111-2-06资助

在线出版日期：2015-01-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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