羰基还原酶工程菌构建及其应用于还原制备S-CHBE

摘要：

S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(S-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)不对称还原合成.该研究对来自Candida magnoliae AKU4643的S1羰基还原酶基因进行E.coli密码子优化,获得的S1'基因序列并进行人工合成,利用该序列构建了基因工程菌BL21(DE3)/pET28a-S1',提高了羰基还原酶表达效率,经诱导条件优化后羰基还原酶活力达11.49 U/mg蛋白;将BL21(DE3)/pET28a-S1'与E.coli BL21(DE3)/pET28a-gdh进行偶联,在单一水相中未添加辅酶条件下转化10 h,产物的摩尔转化率和对映体过量值(e.e.)分别达92.1％和100％.

关键词：生物催化、羰基还原酶、密码子优化、诱导表达、S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯

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资助基金：国家科技支撑计划2009BAI175B02;2011年江西省重大科技专项及江西省亚热带植物资源保护与利用重点实验室开放基金

在线出版日期：2014-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：24-29