表面活性剂脱氧胆酸钠在单增李斯特菌死活细胞EMA-PCR鉴别中的应用

摘要：

通过脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD)结合染料叠氮溴乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)与PCR反应体系相结合,建立纯培养条件下区分单增李斯特菌死活细胞的方法,即SD-EMA-PCR鉴别单增李斯特菌死活细胞检测法.结果表明:向浓度为2.0×108 CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中加入终浓度为1.5 mg/mL的表面活性剂脱氧胆酸钠后,EMA激活光解最佳曝光时间为25 min.SD-EMA-PCR检测体系中,对死菌细胞DNA的PCR扩增抑制的EMA最小浓度为1.6 μg/mL；而对活菌细胞DNA的PCR扩增不抑制的EMA最大浓度为9 μg/mL,活菌细胞的最低检出限为20 CFU/mL.SD-EMA-PCR检测法能够减小EMA-PCR漏检死菌细胞给检测结果带来假阳性的可能,降低了检测的成本,为单增李斯特菌的快速检测提供了一种新的有效途径.

关键词：表面活性剂、脱氧胆酸钠、单增李斯特菌、死活细胞、叠氮溴乙锭

所属期刊栏目：39

资助基金：辽宁省自然科学基金201102196

在线出版日期：2013-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：174-179